CEOS KSILOZA LIZIN DEZOKSIKOLAT AGAR
NAMJENA
CEOS Ksiloza lizin dezoksikolat agar (XLD agar) je selektivni i diferencijalni medij za izolaciju patogenih Ente- robacteriaceae, pogotovo Salmonella spp. i Shigella spp. iz kliničkih uzoraka, uzoraka hrane, mliječnih proizvoda i vode. Priprema medija je u skladu s ISO 6579.
NAČELA I OBJAŠNJENJA
Diferencijacija gram–negativnih enterolitičkih bakterija na CEOS Ksiloza lizin dezoksikolat agaru postiže se fermentacijom ksiloze, dekarboksilacijom lizina i proizvodnjom H2S iz natrij tiosulfata. Natrij dezoksikolat inhibira rast gram-pozitivnih mikroorganizama; fenol crveno djeluje kao pH indikator; željezo amonijev citrat ukazuje na proizvodnju H2 S. Shigella spp. ne fermentira ksilozu, ne uzrokuje kiselost i raste u obliku crvenih kolonija dok Salmonella fermentira ksilozu uz povećanje kiselosti medija te raste u obliku crvenih kolonija s crnim centrom. E. Coli i Enterobacter fermentiraju laktozu i rastu kao žute kolonije.
REAGENSI
CEOS Ksiloza lizin dezoksikolat agar (g/l)
| Ekstrakt kvasca | 3.00 |
| Natrij klorid | 5.00 |
| D (+) ksiloza | 3.75 |
| Laktoza | 7.50 |
| Saharoza | 7.50 |
| L(+) lizin | 5.00 |
| Natrij dezoksikolat | 1.00 |
| Natrij tiosulfat | 6.80 |
| Željezo amonijev citrat | 0.80 |
| Fenolno crvenilo | 0.08 |
| Agar | 14.50 |
pH: 7.4 ± 0.2 Boja: proziran, crvena
KORISNIČKA KONTROLA KVALITETE
Inokulirati reprezentativne uzorke sa sojevima prikazanim u tablici niže.
Inkubirati pri temperaturi od 37°C±2 kroz 24 sata.
| Mikroorganizam | Inokulum (CFU/ml) | Stopa oporavka % | Boja kolonije | Crni centar | Promjena boje medija |
| Escherichia coli ATCC 25922 | > 105 | Ništa do slabo | žuta | - | žuta+precipitat |
| Enterobacter cloacae ATCC 13047 | 103-105 | ≥ 30 | žuta | - | žuta+precipitat |
| Klebsiella pneumoniae ATCC 13883 | 103-105 | ≥ 30 | žuta | - | žuta+precipitat |
| Shigella flexneri ATCC 12022 | 103-105 | ≥ 30 | bezbojna | - | |
| Shigella sonnei ATCC 11060 | 103-105 | ≥ 30 | bezbojna | - | |
| Salmonella typhimurium ATCC 14028 | 103-105 | ≥ 30 | bezbojna | + | - |
| Salmonella enteritidis NCTC 5188 | 103-105 | ≥ 30 | bezbojna | + | - |
| Proteus mirabilis ATCC 14273 | 103-105 | ≥ 30 | žuta | + | žuto / narančasta |
| Enterococcus faecalis ATCC 11700 | > 105 | ništa | - |
Inokulirati materijal po površini ploče (CEOS Ksiloza lizin dezoksikolat agar). Inkubirati aerobno 18-24h na temperaturi 37°C. Ukoliko se CEOS Ksiloza lizin dezoksikolat agar koristi za kliničke uzorke, pridržavati se detalja u protokolu za testiranje u skladu sa standardnim postupcima.
