NAMJENA

CEOS Rose Bengal s kloramfenikolom i dikloranom agar (DRBC) selektivni je medij medij za prebrojavanje kvasca i plijesni u industriji hrane i bezalkoholnih pića. Regulativa: ISO 11133/ISO 21527

NAČELA I OBJAŠNJENJA

CEOS Rose Bengal agar + kolamfenikol + dikloran (DRBC agar) je selektivni medij koji preporuča ISO 21527-1 za brojanje kvasca i plijesni, pomoću tehnike brojanja kolonija, u prehrambenim proizvodima za prehranu ljudi i u hrani za životinje koja sadrži aktivnost vode veću od 0,95, kao što su meso, jaja, mliječni proizvodi (osim mlijeka u prahu), voće, svježe paste, povrće itd. Ova je formula modifikacija Rose Bengal agara. Pepton je izvor dušika, vitamina, minerala i aminokiselina. Dekstroza je fermentirajući ugljikohidrat kao i izvor ugljika i energije. Kalijev fosfat je pufer. Magnezijev sulfat osigurava sumpor i druge elemente u tragovima. Rose Bengal je selektivno sredstvo koje inhibira rast bakterija i ograničava veličinu i visinu brže rastućih plijesni, dopuštajući razvoj i otkriva- nje drugih sporije rastućih kvasca. Plijesni su ružičaste boje. Kloramfenikol služi kao selektivno sredstvo koje inhibira rast bakterija te je preporučeni antibiotik za neutralne medije zbog svoje toplinske stabilnosti i širokog bakterijskog spektra. Dodavanje diklorana sprječava brzo širenje mukoraceoznih gljiva, a također ograničava veličinu kolonija drugih rodova, poboljšavajući broj kolonija. Bakteriološki agar je sredstvo za skrutnjavanje.

REAGENSI

CEOS DRBC agar (g/l)

Glukoza	10,00
Kloramfenikol	0,10
Rose Bengal	0,025
Dikloran	0,002
Enzimska digestija biljaka i životinjskog tkiva	5,00
Monokalijev fosfat	1,00
Magnezij sulfat monohidrat	0,50
Agar	15,00

pH 5,6 ± 0,2
Boja: svijetlo ružičasta, lagano opalescentna.

KORISNIČKA KONTROLA KVALITETE

Prema ISO 11133:
Uvjeti inkubacije: (25±1 ºC / 5 dana).
Uvjeti inokulacije: (100±20. Min.50 CFU)/ Selektivnost (104 -106 CFU).
Referentni medij: SDA

Mikroorganizam	Rezultati ispitivanja
Escherichia coli ATCC 25922	Potpuna inhibicija
Candida albicans ATCC 10231	Dobar rast >50%
Aspergillus brasiliensis ATCC 16404	Dobar rast >50%
Bacillus subtilis ATCC 6633	Potpuna inhibicija
Saccharomyces cerevisiae ATCC 9763	Dobar rast >50%

Za prebrojavanje kvasca i plijesni prema ISO 21527:
- Pripremite dio za ispitivanje, početnu suspenziju (primarno razrjeđivanje) i daljnja razrjeđenja.
- Prenesite 0,1 ml ispitivanog uzorka na jednu ploču s DRBC agarom.
- Na drugu DRBC agar ploču prenesite 0,1 ml prvog decimalnog razrjeđenja (10-1) ili 0,1 ml razrjeđenja 10-2 .
- Raspršite tekućinu po površini agar ploče dok se tekućina potpuno ne upije u medij.
- Inkubirajte pripremljene ploče aerobno, s poklopcem prema gore na 25 ± 1 ºC 5 dana.
- Prebrojite i odaberite kolonije za potvrdu.