CEOS KROMOGENI LISTERIA SELEKTIVNI AGAR PREMA OTTAVIANI I AGOSTI (ALOA)
NAMJENA
CEOS Kromogeni Listeria selektivni agar prema Ottaviani i Agosti (CEOS ALOA) je selektivni agar za izolaciju Listeria spp. i identifikaciju L.monocytogenes u hrani i kliničkim uzorcima.
NAČELA I OBJAŠNJENJA
Selektivnost medija očituje se zbog prisutnosti litij klorida i antimikrobne selektivne smjese koje sadrže ceftazidim, polimiksin B, nalidiksičnu kiselinu i ciklo- heksimid. Diferencijalna aktivnost očituje se u prisut- nosti kromogenih spojeva X-glukozida u mediju, kao supstrata za otkrivanje enzima ß-glukozidaze, koji je zajednički svim Listeria spp. Specifična diferencijalna aktivnost dobiva se pomoću supstrata (L-α-fosfatidi- linositol) za fosfolipazu enzima C, koji je prisutan u L. monocytogenes, te u nekim sojevima L.ivanovii. Zbog kombinacije oba supstrata, moguće je razlikovati ko- lonije Listeria spp., koje rastu u zeleno-plavoj boji, od kolonija L.monocytogenes, koje rastu u zeleno-plavoj boji s neprozirnom ovojnicom. CEOS Listeria selektivni agar prema Ottaviani i Agosti (CEOS ALOA) omogućuje razlikovanje L.monocyto- genes, čak i u prisutnost mješoviti flore, nakon inku- bacije od 24 ± 2h u jednostavnim i pouzdnim uvjetima, kao i direktnim razmazivanjem, ili nakon obogaćivanja u uobičajenom selektivnom tekućem mediju. Ovaj medij se također preporučuje prema ISO 11290- 1 za detekciju i prebrojavanje Listeria monocytogenes.
REAGENSI
CEOS Kromogeni Listeria selektivni agar (ALOA) (g/l)
pH 7.2 ± 0.2 na 25°C Boja: žuta, neprozirna.
Pepton iz mesa | 18.00 |
Enzimska digestija kazeina | 6.00 |
Ekstrakt kvasca | 10.00 |
Natrij piruvat | 2.00 |
Glukoza | 2.00 |
Magnezij glicerofosfat | 1.00 |
Magnezij sulfat | 0.50 |
Natrij klorid | 5.00 |
Litij klorid | 10.00 |
Dehidrirani dinatrij hidrogen fosfat | 2.50 |
BCI glukopiranozid | 0.05 |
Ceftazidim | 0.02 |
Polimiksin B | 76.700 UI |
Nalidiksična kiselina | 0.02 |
Cikloheksimid | 0.05 |
Fosfatidil-Inozitol | 2.00 |
Agar | 12.00 |
KORISNIČKA KONTROLA KVALITETE
Inokulirati reprezentativne uzorke sa sljedećim sojevima:
Mikroorganizmi | Rast |
L.monocytogenes ATCC 13932 | Zeleno-plave kolonije okružene neprozirnom ovojnicom |
L.monocytogenes ATCC 35152 | Zeleno-plave kolonije okružene neprozirnom ovojnicom |
L.innocua ATCC 33090 | Zeleno-plave kolonije bez neprozirne ovojnice |
E.coli ATCC 25922 | Inhibiran |
E.faecalis ATCC 29212 | Inhibiran |
Tehničar mora slijediti protokol potvrđen u njegovom laboratoriju. Inkubirajte ploče stranom prema gore aerobno na 37ºC 24-48 sati. Nakon inkubacije, kolo- nije koje su se pojavile na površini agara sa sljedećim izgledom su: L.monocytogenes - Plavo-zelene kolonije okružene neprozirnom ovojnicom Ostale bakterije - Plave, bezbojne ili potpuno inhibi- rane, bez ovojnice.