CEOS MANITOL SLANI AGAR
NAMJENA
CEOS Manitol slani agar selektivna je i diferencijalna podloga za izolaciju i brojenje stafilokoka iz kliničkih i nekliničkih uzoraka i za njihovu diferencijaciju u skladu s fermentacijom manitola.
NAČELA I OBJAŠNJENJA
CEOS Manitol slani agar formula je koju je osmislio Chapman za diferencijaciju koagulaza pozitivnih stafilokoka (npr. Staphylococcus aureus) iz koagulaza negativnih stafilokoka. CEOS Manitol slani agar koristi se za izolaciju stafilokoka iz kliničkih uzoraka, iz kozmetičkih proizvoda, te procjenu broja mikroorganizama u uzorku. CEOS Manitol slani agar sadrži peptone i goveđi ekstrakt koji opskrbljuju podlogu esencijalnim hranjivim tvarima. Koncentracija natrijevog klorida od 7,5% rezultira djelomičnom ili potpunom inhibicijom bakterijskih organizama koji nisu stafilokoki. Fermentacija manitola, kao što je označeno promjenom u fenolnom crvenom indikatoru, pomaže u diferencijaciji vrsta stafilokoka. Koagulaza pozitivni stafilokoki (npr. Staphylococcus aureus) stvaraju žute kolonije i žuto područje oko njih na podlozi dok koagulaza negativni stafilokoki stvaraju crvene kolonije i ne mijenja se boja fenolnog crvenog indikatora. CEOS Manitol slani agar je selektivni obogaćen medij koji se koristi za izolaciju patogenih stafilokoka. Medij sadrži manitol kao jedini fermentirajući ugljikohidrat i fenol crveno kao pH indikator. S.aureus pokazuju dobar rast, nakon 18-48 sati inkubacije na 37ºC s promjenom boje medija od crvene do žute. S. epidermis raste bez promjene boje indikatora.
REAGENSI
CEOS Manitol slani agar (g/l)
| Goveđi ekstrakt | 1,00 |
| Pankreatična digestija kazeina | 5,00 |
| Peptična digestija životinjskog tkiva | 5,00 |
| Natrij klorid | 75,00 |
| D-Manitol | 10,00 |
| Fenol crveno | 0,025 |
| Agar | 15,00 |
pH 7,4 ± 0,2
Boja: ružičasto crvena.
KORISNIČKA KONTROLA KVALITETE
Inokulirati reprezentativne uzorke sa sljedećim soje- vima:
| Mikroorganizmi | Rezultati rasta |
| Staphylococcus aureus ATCC 6538 | Žute kolonije srednje veličine, srednje žuta boja |
| Staphylococcus aureus ATCC 25923 | Žute kolonije srednje veličine, srednje žuta boja |
| Staphylococcus epidermidis ATCC 12228 | Male do srednje velike bijele kolonije, srednje crvena boja |
| Proteus mirabilis ATCC 12453 | Djelomična (do potpuna) inhibicija; bezbojne kolonije, inhibirano množenje |
| Escherichia coli ATCC 25922 | Potpuna inhibicija |
| Nije inokulirano | Crvena boja |
Inkubirati na 35±2ºC kroz 18-24 sata i 48 sati.
Razmazati uzorak odmah po primitku u laboratorij. Ploča s razmazom primarno se koristi za izolaciju čistih kultura iz uzoraka koji sadrže miješanu floru. Drugi način je, u slučaju da se kultura nanosi na materijal izravno štapićem, štapić protrljati po malom dijelu površine na rubu i zatim razmazati iz tog inokuliranog dijela. Inkubirati ploče 24 – 48 h na temperaturi od 35 ± 2 °C u aerobnoj atmosferi. Nakon inkubacije treba pregledati ploče radi prisutnosti kolonija stafilokoka. Kolonije na kojima se pojavljuju stafilokoki treba dalje diferencirati kako bi se potvrdio njiihov identitet.
