NAMJENA

CEOS MacConkey sorbitol agar je selektivni i diferencijalni medij za Escherichia coli O157: H7.

NAČELA I OBJAŠNJENJA

Želatinski pepton osigurava dušik, vitamine, minerale i aminokiseline neophodne za rast. Sorbitol je izvor energije ugljikohidrata. Žučne soli Nº3 i kristalno ljubičasto su inhibitori Gram-pozitivnih organizama. Natrijev klorid pruža esencijalne elektrolite za transport i osmotsku ravnotežu. Neutralno crveno je pH indikator, kada je sorbitol fermentiran, pH medija se smanjuje, mijenjajući boju iz neutralno crvene u ružičastu. Agar je sredstvo za skrućivanje. E. coli O157:H7 ne fermentira sorbitol i stoga stvara bezbojne kolonije. Kako ga većina drugih E. coli fermentira, njihove su kolonije ružičaste.

REAGENSI

CEOS MacConkey sorbitol agar (g/l)

Enzimatska digestija kazeina	17.00
Enzimatska digestija životinjskog tkiva	3.00
D-Sorbitol	10.00
Žučne soli	1.50
Natrij klorid	5.00
Neutralno crveno	0.03
Kristal ljubičasto	0.001
Agar	15.00

pH 7.1±0.2
Boja: ljubičasto crvena.

KORISNIČKA KONTROLA KVALITETE

Inokulirati reprezentativne uzorke sa sljedećim sojevima:

Mikroorganizmi	Rezultati
E. coli O157:H7 ATCC 33150 (sorbitol negativno)	Dobar rast, bezbojne kolonije
E. coli ATTC 25922 (sorbitol pozitivno)	Dobar rast, ružičaste kolonije
Enterococcus faecalis ATCC 21212	Djelomična do potpuna inhibicija

Inokulacija:
Kvalitativna produktivnost: 103 -104 CFU
Selektivnost: 104 -106 CFU
Inkubirati pri temperaturi od 35°C ± 2 kroz 24-18 sata.

Inokulirajte ploče izravnim nanošenjem na površinu agara ili raširite uzorak iz kulture za obogaćivanje. Inkubirajte aerobno na 35 ±2°C 18-24 h. Sorbitol-fermentirajući organizmi, poput uobičajenih sojeva E. coli, stvaraju kolonije ružičaste do crvene boje. Organizmi koji ne fermentiraju sorbitol, poput E. coli O157: H7, rastu kao bezbojne kolonije. Za potvrdu serotipa i / ili toksina potrebni su serološki ili molekularni testovi. Enterokoki, stafilokoki i ostale gram-pozitivne bakterije djelomično ili potpuno su inhibirane.